StarBright Violet蛍光色素

StarBright Violet 440 (SBV440) は，BV421，SB436，Pacific Blue，V450，vioBlue，Alexa Fluor 405 などの色素を含む，420～480 nm に蛍光極大を持つ蛍光色素の優れた代替品です．Violet 405 nm レーザーで励起され，436 nm で蛍光を発するこの色素は，ZE5 セルアナライザーの 460/22 フィルター，または他の装置の同様のフィルター（450/50 など）を使用して検出できます．これにより，発現量の低いマーカーを検出する際の選択肢が広がり，柔軟性が高まります．

Fig. 2. SBV440．A, 従来のスペクトル．Violetレーザー（点線）による励起と，蛍光ヒストグラムB:正規化色素シグネチャー．全波長での全蛍光スペクトル．データは，SpectroFloソフトウェアを用いて5L Cytek Auroraフローサイトメトリーシステムで収集した．

Fig. 3. 明るさの比較．マウス末梢血をCD4SBV440(MCA2691SBV440)（赤），CD4 Pacific Blue（青），またはCD4 SuperBright 436（緑）で染色し，460/22フィルターを用いて検出したZE5 Cell Analyzerで解析した．すべての抗体は使用前に滴定し，最適濃度を決定した．

Fig. 4. SBV440の優れた性能．ヒト末梢血中のB細胞およびT細胞集団を同定する6色パネルにおいて，SBV440はPEを使用するよりもCD127lo CD25+ Tregの分解能が優れている．使用した抗体 CD19PE-750(MCA1940P750), CD3A488 (MCA463A488), CD127A647, CD4A700 (MCA1267A700), CD8PE-A647,CD25PE (MCA2127PE) または CD25SBV440 (MCA2125SBV440).

StarBright Violet 475 (SBV475) は，405nmのvioletレーザーで励起され，479nmで蛍光を発するため，ほとんどの装置で使用可能な標準フィルターで容易に検出可能です．StarBright Violet 475 は，スペクトルフローサイトメトリーにも適合し，ユニークなプロファイルを有するため，新規および既存のフローサイトメトリーパネルに組み込むことができ，より高い柔軟性とマルチプレックス機能を提供します．SBV475のユニークなプロファイルにより，フルスペクトルフローサイトメトリーを使用する場合，この色素をStarBright Violet 515 (SBV515) およびBrilliant Violet 510 (BV510)と組み合わせてパネルに使用することができます．

Fig. 5. SBV475．A, 従来のスペクトル．バイオレットレーザー（点線）による励起と，蛍光ヒストグラム．B, 正規化色素シグネチャー． 全波長での蛍光スペクトル．データは，SpectroFloソフトウェアを用いて5L Cytek Auroraフローサイトメトリーシステムで収集した．

Fig. 6. 明るさの比較． ヒト末梢血をCD4SBV475 (MCA1267SBV475)（赤）またはCD4 BV480（青）で染色し，525/50フィルターを用いて検出したZE5 Cell Analyzerで分析した．すべての抗体は使用前に滴定し，最適濃度を決定した．

Fig. 7. SBV475の染色例 ． ヒト末梢血をA, CD3SBB700 (MCA463SBB700) と CD4SBV475 (MCA1267SBV475); B, CD3BV711（BD）とCD4SBV475 (MCA1267SBV475); C, CD14A488 (MCA1568A488) と CD33SBV475 (MCA1271SBV475); および D, CD3A700 (MCA463A700) と CD27SBV475 (MCA755SBV475). すべての染色は，Brilliant Bufferで染色した(D)を除き，10%のヒト血清でブロッキングした後，1%のBSAを含むPBS中，4℃で行った．細胞は ZE5 Cell Analyzer で解析した．

Violet 405 nmレーザーに励起され，515 nmで蛍光を発する StarBright Violet 515 （SBV515） 蛍光色素は，500 nmから550 nmの波長範囲で最大蛍光を示す蛍光色素（例：Pacific Orange，Krome Orange，vioGreen，Brilliant Violet 510）の理想的な代替品です．これらの色素は，フローサイトメトリー実験において525/50フィルター（または同等品）で検出可能です．

Fig. 8. SBV515．A, 従来のスペクトル．Violetレーザー（点線）による励起と蛍光ヒストグラム．B, 正規化色素シグネチャー． 全波長での全蛍光スペクトル．データは，SpectroFloソフトウェアを用いて5L Cytek Auroraフローサイトメトリーシステムで収集した．

Fig. 9. 明るさの比較．マウス末梢血をCD4SBV515(MCA2691SBV515) (（赤）またはCD4BV510（青）で染色し，525/50フィルターを用いて検出したZE5 Cell Analyzerで解析した．すべての抗体は使用前に滴定し，最適濃度を決定した．

Fig. 10. SBV515の染色例．ヒトまたはマウス末梢血を，A, CD45RASBV515 (MCA88SBV515) および CD45ROSBV610 (MCA461SBV610) B, CD8SBV515 (MCA1226SBV515) およびCD4BV510 C, CD19SBV515 (MCA1439SBV515) と CD45RA488 (MCA1258SBV515)  D, CD27SBV515 (MCA755SBV515) と CD3A647 (MCA463A647). で染色した．染色はすべて，10%血清でブロッキングした後，1%BSAを含むPBS中，4℃で行った．細胞は，Cytek Auroraで解析したBを除き ZE5 Cell Analyzer,で解析した．

StarBrigh Violet 570 (SBV570) は，violet 405 nmレーザーで励起され，570 nmで蛍光を発します．SBV570は，Brilliant Violet 570 (BV570) のような同様の励起および蛍光プロファイルを持つ色素よりも明るく，PE へのスピルオーバーを低減します．SBV570 は ZE5 セルアナライザーでも検出できますが，405 nm レーザーを搭載した S3e セルソーターでは，構成に応じて 586/25 または 593/40 フィルターを備えているため，SBV570 が最適に検出されます．また，独自のスペクトルプロファイルにより，同様のフィルターを備えたセルアナライザーやソーター，およびスペクトルフローサイトメトリーでの使用にも適しています．

Fig. 11. SBV570．A, 従来のスペクトル．Violetレーザー（点線）による励起と蛍光ヒストグラム．B, 正規化色素シグネチャー．全波長での全発光スペクトル．データは，SpectroFloソフトウェアを用いて5L Cytek Auroraフローサイトメトリーシステムで収集した．

Fig. 12. 明るさの比較．ヒト末梢血をCD4SBV570 (MCA1267SBV570)（赤）またはCD4BV570（青）で染色し，615/24フィルターを用いて検出したZE5 Cell Analyzerで分析した．すべての抗体は使用前に滴定し，最適濃度を決定した．

Fig. 13. StarBright蛍光色素を用いることで，ソーティングの純度と回収率が向上した．ヒトPBMCをCD3 FITC (MCA463F) とA, CD8BV570または B, CD8SBV570 (MCA1226SBV570). で染色した．回収された細胞数と純度（%）をプロットに示す．

StarBright Violet 610 (SBV610) はviolet 405 nmレーザーで励起され，607 nmで最大の蛍光を発します．ZE5セルアナライザーの615/24フィルターまたは他の装置の同様のフィルターを用いて最適に検出されます．StarBright Violet 610 は，スペクトルフローサイトメトリーに適合し，独自のプロファイルを持つため，新規および既存のフローサイトメトリーパネルに組み込むことができます．

Fig. 14. SBV610．A, 従来のスペクトル．バイオレットレーザー（点線）による励起と蛍光ヒストグラムB, 正規化色素シグネチャー． 全波長での全蛍光スペクトル．データは，SpectroFloソフトウェアを用いて5L Cytek Auroraフローサイトメトリーシステムで収集した．

Fig. 15. 明るさの比較．ヒト末梢血をCD4SBV610 (MCA1267SBV610) （赤）またはCD4 BV605（青）で染色し，615/24フィルターを用いて検出したZE5 Cell Analyzerで解析．すべての抗体は使用前に滴定し，最適濃度を決定した．

Fig. 16. SBV610蛍光色素の染色例．ヒト末梢血を，A, CD4SBV610 (MCA1267SBV610) と  CD8SBV710 (MCA1226SBV710) B, CD8SBV610 (MCA1226SBV610) と CD4BV605 (BD) C, CD7ビオチン (MCA1197B) およびストレプトアビジンSBV610 (STAR210SBV610) ，およびD, CD62LSBV610 (MCA1076SBV610) およびCD3A647 (MCA463A647). で染色した．染色はすべて，10%血清でブロッキングした後，1%BSAを含むPBS中，4℃で行った．細胞は，Cytek Auroraで解析したBを除き, ZE5 Cell Analyzer, で解析した．

StarBright Violet 670 (SBV670) Dye は，405 nm のvioletレーザーで励起され，667 nm で最大の蛍光を発します．ZE5セルアナライザーの670/30フィルター，または他の装置の同様のフィルターを使用して，PE-A674およびA647チャンネルへのスピルオーバーを低減して検出できます．SBV670 はスペクトルフローサイトメトリーにも対応しており，独自のプロファイルを持つため，新規および既存のフローサイトメトリーパネルに組み込むことができます．

Fig. 17. SBV670．A, 従来のスペクトル．Violetレーザー（点線）による励起と，蛍光ヒストグラム．B, 正規化色素シグネチャー． 全波長での全蛍光スペクトル．データは，SpectroFloソフトウェアを用いて5L Cytek Auroraフローサイトメトリーシステムで収集した．

Fig. 18. 明るさの比較．ヒト末梢血をCD4SBV670 (MCA1267SBV670)（赤）またはCD4BV650（青）で染色し，670/30フィルターを用いて検出したZE5 Cell Analyzerで解析した．すべての抗体は使用前に滴定し，最適濃度を決定した．

Fig. 19. SBV670色素の染色例．マウス骨髄（A）またはヒト末梢血（B-D）を， A, CD11bSBV440 (MCA711SBV440) およびCD117SBV670 (MCA1365SBV670) B, CD45RASBV610 (MCA88SBV610) および CD27SBV670 (MCA755SBV670) C, CD3A488 (MCA463A488) および CD69SBV670 (MCA2806SBV670) D, CD4SBB580（Coming soon）およびCD31SBV670 (MCA1738SBV670). で染色した．染色はすべて，10%血清でブロッキングした後，1%BSAを含むPBS中，4℃で行った．細胞は，Cytek Auroraで解析したDを除き，ZE5 Cell Analyzer, で解析した．

StarBright Violet 710 (SBV710) は，violet 405 nmレーザーで励起され，713 nmで最大の蛍光を発します．ZE5セルアナライザーの720/60フィルターまたは他の装置の同様のフィルターを使用して，特にA700チャンネルへのスピルオーバーを低減して検出できます．SBV710 はスペクトルフローサイトメトリーにも対応しており，独自のプロファイルを持つため，新規および既存のフローサイトメトリーパネルに組み込むことができます．

Fig. 20. SBV710．A, 従来のスペクトル．Violet（点線）による励起と蛍光ヒストグラム．．B:正規化色素シグネチャー． 全波長での全蛍光スペクトル．データは，SpectroFloソフトウェアを用いて5L Cytek Auroraフローサイトメトリーシステムで収集した．

Fig. 21. 明るさの比較ヒト末梢血をCD4SBV710(MCA1267SBV710)（赤）またはCD4 BV711（青）で染色し，ZE5 Cell Analyzerの720/60フィルターを用いて解析した．すべての抗体は使用前に滴定し，最適濃度を決定した．

Fig. 22. SBV710色素の染色例． ヒト末梢血をA, CD3A488 (MCA463A488) および CD69SBV710 (MCA2806SBV710) B, CD3SBV440 (MCA463SBV440) およびHLA DP/DQ/IRSBV71 (MCA477SBV710) C, CD4SBUV510 (MCA1267SBUV510) および CD8SBV710 (MCA1226SBV710) D, TCRgdBV711およびCD14SBV710 (MCA1568SBV710). で染色した．染色はすべて，10%血清でブロッキングした後，1%BSAを含むPBS中，4℃で行った．細胞は，Cytek Auroraで解析したDを除き, ZE5 Cell Analyzer, で解析した．

StarBright Violet 760 (SBV760) は，violet 405 nm レーザーで励起され，760 nm で最大の蛍光を発します．ZE5セルアナライザーの750LPフィルターまたは他の装置の同様のフィルターを使用して検出できます．SBV760は，類似の最大蛍光波長を持つ他の色素と同様のスピルオーバープロファイルを持ちますが，より明るいため，陽性集団と陰性集団の間の優れた分離能が得られます．

Fig. 23. SBV760．A, 従来のスペクトル．Violet（点線）による励起と蛍光ヒストグラム．B:正規化色素シグネチャー．全波長での全蛍光スペクトル．データは，SpectroFlo ソフトウェアを使用し，5L Cytek Aurora フローサイトメトリーシステムで収集した．

Fig. 24. 明るさの比較．ヒト末梢血をCD4SBV760 (MCA1267SBV760)（赤）またはCD4 BV750（青）で染色し，750LPフィルターを用いて検出したZE5 Cell Analyzerで解析．すべての抗体は使用前に滴定し，最適濃度を決定した．

Fig. 25. SBV760の染色例．ヒト末梢血（A-C）またはマウス末梢血（D）を， A, CD16A647 (MCA2537A647) および CD14SBV760 (MCA1568SBV760) B, CD3A647 (MCA463A647) および CD38 (MCA1039SBV760) C, CD3SBV440 (MCA463SBV440) および CD28SBV760 (MCA709SBV760) D, CD8aSBUV400 (MCA609SBUV400) および CD161SBV760 (MCA1266SBV760). で染色した．染色はすべて，10%血清でブロッキングした後，1%BSAを含むPBS中，4℃で行った．細胞は ZE5 Cell Analyzer で分析した.

StarBright Violet 790 (SBV790) は，violet 405 nm レーザーで励起され，782 nm で最大の蛍光を発します．ZE5セルアナライザーの750LPフィルターまたは他の装置の同様のフィルターを使用して検出できます．SBV790はスペクトルフローサイトメトリーにも適合し，独自のプロファイルを持つため，新規および既存のフローサイトメトリーパネルに組み込むことができます．

Fig. 26. SBV790．A, 従来のスペクトル．Violetレーザー（点線）による励起と，蛍光ヒストグラム． 全波長での全蛍光スペクトル．データは，SpectroFloソフトウェアを用いて5L Cytek Auroraフローサイトメトリーシステムで収集した．

Fig. 27. 明るさの比較．ヒト末梢血をCD4SBV790 (MCA1267SBV790)（赤）またはCD4 BV785（青）で染色し，670/30フィルターを用いて検出したZE5 Cell Analyzerで解析．すべての抗体は使用前に滴定し，最適濃度を決定した．

Fig. 28. SBV790の染色例． ヒト末梢血（A-C）またはマウス骨髄（D）を， A, CD16A700 (MCA2537A700) および CD14SBV790 (MCA1568SBV790) B, CD14SBV710 (MCA1568SBV710) およびHLA DP/DQ/DRSBV790 (MCA477SBV790) C, CD20SBV515 (MCA1710SBV515) および CD19SBV790 (MCA1910SBV790) D, CD19A488 (MCA1258A488) および CD45RSBV790 (MCA1439SBV790). で染色した．染色はすべて，10%血清でブロッキングした後，1%BSAを含むPBS中，4℃で行った．細胞は ZE5 Cell Analyzer で分析した．