
488nmレーザーで励起可能なStarBright™ Blue (SBB) 蛍光色素は,フローサイトメトリーパネルの既存色素との置き換えに最適で,blueレーザーの機能を拡張します.
561 nmおよび640 nmのレーザーによる励起を抑え,ほとんどのポピュレーションを分離するのに十分な明るさに設計されたStarBright Blue蛍光色素は,パネルデザインにおける最初の選択肢となるはずです.
StarBright Dye |
Max Ex, nm |
Max Em, nm |
Brightness (1-5) |
5-Laser ZE5 Cell Analyzer Optimal Filter |
3/4-Laser ZE5 Cell Analyzer Optimal Filter |
Comparison Dye |
Launch Date |
Flier |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
|
475 |
582 |
4 |
593/52 |
583/30 |
- |
Available now |
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|
475 |
612 |
4 |
593/52 |
615/24 |
- |
Available now |
||
|
476 |
675 |
5 |
692/80 |
692/80 |
PerCP |
Available now |
||
|
473 |
703 |
5 |
692/80 |
692/80 |
PerCP-Cy5.5, BB700, PerCP-eFluor710 |
Available now |
||
|
476 |
764 |
4 |
750LP |
750LP |
- |
Available now |
||
|
477 |
802 |
4 |
750LP |
750LP |
- |
Available now |
Fig. 1. StarBright Blue蛍光色素の励起および蛍光スペクトル.
以下に,使用情報,従来のスペクトルビジュアル(波長とチャンネル),輝度比較データなど,個々の蛍光色素についてのより詳細な情報を提供します.“+”をクリックすると,ご希望の情報が表示されます.
SBB580 は独自の狭い励起および蛍光プロファイルを持ち,488 nmレーザー励起される明るい色素であり,従来のフローサイトメトリーおよびフルスペクトルフローサイトメトリーにも適しています(Fig. 2).
Fig. 2. SBB580.A, 従来のスペクトル. Blueレーザー(点線)による励起と蛍光ヒストグラム.B, ノーマライズされた蛍光シグネチャー.全波長での蛍光スペクトル.データは,SpectroFloソフトウェアを使用して,5-L Cytek Auroraフローサイトメトリーシステムで収集した.
Fig. 3. 明るさの比較.ヒトの末梢血をCD4 SBB580 (MCA1267SBB580) またはCD4 AF532とCD4 PEで染色した.SBB580はAF532の10倍以上明るく,PEとほぼ同じ明るさである.
AF532のような他の488 nmレーザー励起色素よりも明るく,488 nmレーザーで励起するとPEと同程度の明るさになります(Fig. 3).
また,PEと比較して561nmレーザーによる励起が少ないという利点もあります.
SBB580とPEは,488nmと561nmの両方のレーザーを使用する場合にそれぞれの色素を励起するため,パネル内で互換性があります.
SBB615蛍光色素は,488 nmレーザーで励起されるユニークで狭い励起および蛍光プロファイルを持つ明るい色素です.従来のフローサイトメトリーおよびフルスペクトルフローサイトメトリーに適しています(Fig. 4).
Fig. 4. SBB615.A, 従来のスペクトル.Blueレーザー(点線)による励起と蛍光ヒストグラム.B, 正規化色素シグネチャー. 全波長での全蛍光スペクトル.データは,SpectroFloソフトウェアを使用して,5-L Cytek Auroraフローサイトメトリーシステムで収集した.
Fig. 5. 明るさ比較.ヒト末梢血をCD4 SBB615 (MCA1267SBB615),CD4 PE-CF594,またはCD4 PE-Dazzle-594で染色した.SBB615はPE-CF594およびPE-Dazzle594の2倍以上明るい.
一部の分光分析装置において,SBB615 は405 nmで強く 励起され,SBV610 や BV605 と類似した蛍光波長を持つ 405 nm 励起色素との間にスプレッドを生じます.
SBB615は,488 nmで励起された場合,PE-CF594およびPE-Dazzle594よりも明るく,561 nmのレーザーでは同程度には励起されません(Fig. 5).
SBB615は従来のタンデム色素ではないため,タンデム分解や経時的な染色の変化に関する問題を生じません.SBB615は,488nmレーザーを組み込んだマルチカラーパネルを構築する際に,より多くの選択肢と柔軟性を提供できます.
SBB675 は,488 nmレーザーで励起される非常に明るい蛍光色素で,独自の狭い励起および蛍光プロファイルを有し,従来のフローサイトメトリーおよびフルスペクトルフローサイトメトリーに適しています(Fig. 6).
Fig. 6. SBB675.A, 従来のスペクトル.Blueレーザー(点線)による励起と蛍光ヒストグラムB, 正規化色素シグネチャー. 全波長での全蛍光スペクトル.データは,SpectroFloソフトウェアを使用して,5-L Cytek Auroraフローサイトメトリーシステムで収集した.
Fig. 7. 明るさの比較.ヒト末梢血をCD4 SBB675 (MCA1267SBB675),CD4 PerCP-Cy5.5,CD4 BB700,およびCD4 PE-Cy5で染色した.SBB675はPerCP-Cy5.5の10倍,BB700の5倍の明るさである.
488nmレーザーで励起した場合,PerCP-Cy5.5(およびPerCP),BB700,PE-Cy5などの他の488nmレーザー励起色素よりも明るい(Fig. 7).
SBB675は従来のタンデム色素ではないため,タンデム分解や経時的な染色の変化に関する問題はない.
SBB675は,PEタンデム色素と比較して,561 nmレーザーによる励起が抑制されている.SBB675は,488 nmレーザーを組み込んだマルチカラーパネルを構築する際に,より多くの選択肢と柔軟性を提供します.
SBB700蛍光色素は,フローサイトメトリー実験において,PerCP,PerCP-Cy5.5などのPerCPベースのタンデム色素,Brilliant Blue 700(BB700)の優れた代替品です.BB700と同程度に明るく,PerCP-Cy5.5よりも明るい(Fig. 9).さらに,SBB700 はユニークなスペクトルプロファイルを持っているため,フルスペクトラムのフローサイトメトリーで PerCP-Cy5.5 や BB700 と組み合わせることができます(Fig. 10).
Fig. 8. SBB700.A, 従来のスペクトル.Blueレーザー(点線)による励起と蛍光ヒストグラム.B, ノーマライズされた色素シグネチャー.全波長での全蛍光スペクトル.データは,SpectroFlo ソフトウェアを使用し,5L Cytek Aurora フローサイトメトリーシステムで収集した.
Fig. 9. 明るさの比較.ヒト末梢血をCD4 SBB700 (MCA1267SBB700) またはCD4 PerCP-Cy5.5とCD4 BB700で染色した.SBB700はPerCP-Cy5.5の4倍明るく,BB700の1.5倍明るい.
明るさの増加に加えて,SBB700は640nmレーザーによる励起が減少しているため,PerCP-Cy5.5やBB700と比較して,多色パネルでA647やA700と組み合わせる際に必要な補正が少なくて済む.
SBB700をStarBright Violet 710 (SBV710) 蛍光色素と組み合わせた場合,比較的高いレベルの補正が必要となることがあり,その結果,~2の値が広がる.
これは大きな問題ではありませんが,コンベンショナルフローではこの組み合わせに相互排他的マーカーを使用することをお勧めします.この組み合わせは,スペクトルフローサイトメトリーにおける類似性スコアが0.64であり(SpectroFloソフトウェアを使用して決定),したがって,使用するには優れた組み合わせである.
Fig. 10. フルスペクトルフローサイトメトリーにおけるSBB700.A,SBB700とPerCP-Cy5.5の全波長における蛍光スペクトル.B,ヒト末梢血単球をCD20 PerCP-Cy5.5とCD45RO SBB700(MCA461SBB700) で染色し,B細胞とT細胞のメモリー集団を明らかにした.データはCytek AuroraフローサイトメトリーシステムでSpectroFloソフトウェアを用いて収集した
SBB765 Dyeは,488 nmのレーザーで励起される色素で,独自の狭い励起・蛍光プロファイルを有し,従来のフローサイトメトリーおよびフルスペクトルフローサイトメトリーに適しています..
Fig. 11. SBB765.A, 従来のスペクトル. Blueレーザー(点線)による励起と蛍光ヒストグラム.B, 正規化色素シグネチャー.全波長での蛍光を示す全蛍光スペクトル.データは,SpectroFloソフトウェアを使用して,5-L Cytek Auroraフローサイトメトリーシステムで収集した.
Fig. 12. 明るさ比較.ヒト末梢血をCD4 SBB765 (MCA1267SBB765) またはCD4 PE-Cy7で染色した.SBB765は,488 nmレーザーで励起された際にPE-Cy7のほぼ2倍の輝度を示す.
一部の分光分析装置では,SBB765 は 405 nm で強く励起されるため,SBV760 や BV750 のような類似した蛍光波長を持つ 405 nm 励起色素との間にスプレッドを生じます(Fig. 11).
488 nmのレーザーで励起すると,PE-Cy7よりも明るくなります(Fig. 12).SBB765は従来のタンデム色素ではないため,タンデム分解や経時的な染色の変化に関する問題がなく,PEタンデム色素と比較して561 nmレーザーによる励起が減少しています.
SBB765は,488 nmレーザーを組み込んだマルチカラーパネルを構築する際に,より多くの選択肢と柔軟性を提供します.
SBB810は,独自の狭い励起および蛍光プロファイルを持つ,488 nmレーザーで励起される明るい色素であり,従来のフローサイトメトリーおよびフルスペクトルフローサイトメトリーに適しています(Fig. 13).
Fig. 13. SBB810.A, 従来のスペクトル.Blueレーザー(点線)による励起と蛍光ヒストグラム.B, ノーマライズされた色素シグネチャー.. 全波長での全蛍光スペクトル.データは,SpectroFlo ソフトウェアを使用し,5L Cytek Aurora フローサイトメトリーシステムで収集した.
Fig. 14. 明るさの比較. ヒト末梢血をCD4 SBB810 (MCA1267SBB810) またはCD4 PE-Cy7で染色した.SBB810は,488 nmのレーザーで励起された際にPE-Cy7よりも明るい.
一部の分光分析装置では,SBB765と同じチャンネル(B14)で最大蛍光を示すことがあるが,類似度スコアが0.85であるため,併用可能である.SBB765よりも暗いにもかかわらず,405nmレーザーによる励起が低減されているため,パネルによってはこちらの方が適している場合もある.
488nmレーザーで励起した場合は,PE-Cy7よりも明るい(Fig. 14).SBB810は従来のタンデム色素ではないため,タンデム分解や経時的な染色の変化に関する問題はなく,PEタンデム色素と比較して561 nmレーザーによる励起が減少しています.
SBB810は,488 nmレーザーを組み込んだマルチカラーパネルを構築する際に,より多くの選択肢と柔軟性を提供します.
Fig. 15. SBBおよびSBV蛍光色素を含む10色パネル.ヒト末梢血をCD45 (MCA87SBV515), CD56 (MCA2693A647), CD3 (MCA463F), CD19 (MCA1940SBB810), CD4 (MCA1267SBV440), CD8 (MCA1226SBB580), で染色し,NK細胞,BおよびTリンパ球,Tヘルパー,T細胞傷害性細胞を同定した.CD14 (MCA1568SBV610) とCD16 (MCA2537A700). を用いて,クラシカル,中間的,非クラシカル単球を同定した.CD45RA (MCA88SBV710) およびCD45RO (MCA461SBB675) を用いて,ナイーブ細胞およびメモリー細胞を同定した.データはZE5 Cell Analyzerで作成.
| Description | Target | Format | Clone | Applications | Citations | Code |
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