StarBright Blue蛍光色素

488nmレーザーで励起可能なStarBright™ Blue (SBB) 蛍光色素は,フローサイトメトリーパネルの既存色素との置き換えに最適で,blueレーザーの機能を拡張します.

561 nmおよび640 nmのレーザーによる励起を抑え,ほとんどのポピュレーションを分離するのに十分な明るさに設計されたStarBright Blue蛍光色素は,パネルデザインにおける最初の選択肢となるはずです.

SBB蛍光色素レンジ 

StarBright Dye

Max Ex, nm

Max Em, nm

Brightness (1-5)

5-Laser ZE5 Cell Analyzer Optimal Filter

3/4-Laser ZE5 Cell Analyzer Optimal Filter

Comparison Dye

Launch Date

Flier

StarBright Blue 580  Dye

475

582

4

593/52

583/30

-

Available now

 

StarBright Blue 615  Dye

475

612

4

593/52

615/24

-

Available now

 

StarBright Blue 675  Dye

476

675

5

692/80

692/80

PerCP

Available now

 

StarBright Blue 700  Dye

473

703

5

692/80

692/80

PerCP-Cy5.5, BB700, PerCP-eFluor710

Available now

SBB700 PDF

StarBright Blue 765  Dye

476

764

4

750LP

750LP

-

Available now

 

StarBright Blue 810  Dye

477

802

4

750LP

750LP

-

Available now

 

Abbreviations: Axxx, Alexa Fluor; BB, Brilliant Blue; Cy, cyanine; FITC, fluorescein isothiocyanate; PerCP, peridinin chlorophyll protein.
Fig. 1. Excitation and emission spectra of StarBright Blue Dyes.


Fig. 1. StarBright Blue蛍光色素の励起および蛍光スペクトル.

StarBright Blue蛍光色素フォーカス

以下に,使用情報,従来のスペクトルビジュアル(波長とチャンネル),輝度比較データなど,個々の蛍光色素についてのより詳細な情報を提供します.“+”をクリックすると,ご希望の情報が表示されます.


StarBright Blue 580 (SBB580)蛍光色素


SBB580 は独自の狭い励起および蛍光プロファイルを持ち,488 nmレーザー励起される明るい色素であり,従来のフローサイトメトリーおよびフルスペクトルフローサイトメトリーにも適しています(Fig. 2).

Fig. 2. SBB580.A, 従来のスペクトル.


Fig. 2. SBB580.A, 従来のスペクトル. Blueレーザー(点線)による励起と蛍光ヒストグラム.B, ノーマライズされた蛍光シグネチャー.全波長での蛍光スペクトル.データは,SpectroFloソフトウェアを使用して,5-L Cytek Auroraフローサイトメトリーシステムで収集した.

Fig. 3. 明るさの比較.

Fig. 3. 明るさの比較.ヒトの末梢血をCD4 SBB580 (MCA1267SBB580) またはCD4 AF532とCD4 PEで染色した.SBB580はAF532の10倍以上明るく,PEとほぼ同じ明るさである.

AF532のような他の488 nmレーザー励起色素よりも明るく,488 nmレーザーで励起するとPEと同程度の明るさになります(Fig. 3).

また,PEと比較して561nmレーザーによる励起が少ないという利点もあります.

SBB580とPEは,488nmと561nmの両方のレーザーを使用する場合にそれぞれの色素を励起するため,パネル内で互換性があります.


StarBright Blue 615 (SBB615)蛍光色素


SBB615蛍光色素は,488 nmレーザーで励起されるユニークで狭い励起および蛍光プロファイルを持つ明るい色素です.従来のフローサイトメトリーおよびフルスペクトルフローサイトメトリーに適しています(Fig. 4).

Fig. 4. SBB615.A, 従来のスペクトル.


Fig. 4. SBB615.A, 従来のスペクトル.Blueレーザー(点線)による励起と蛍光ヒストグラム.B, 正規化色素シグネチャー. 全波長での全蛍光スペクトル.データは,SpectroFloソフトウェアを使用して,5-L Cytek Auroraフローサイトメトリーシステムで収集した.

Fig. 5. 明るさ比較.

Fig. 5. 明るさ比較.ヒト末梢血をCD4 SBB615 (MCA1267SBB615),CD4 PE-CF594,またはCD4 PE-Dazzle-594で染色した.SBB615はPE-CF594およびPE-Dazzle594の2倍以上明るい.

一部の分光分析装置において,SBB615 は405 nmで強く 励起され,SBV610 や BV605 と類似した蛍光波長を持つ 405 nm 励起色素との間にスプレッドを生じます.

SBB615は,488 nmで励起された場合,PE-CF594およびPE-Dazzle594よりも明るく,561 nmのレーザーでは同程度には励起されません(Fig. 5).

SBB615は従来のタンデム色素ではないため,タンデム分解や経時的な染色の変化に関する問題を生じません.SBB615は,488nmレーザーを組み込んだマルチカラーパネルを構築する際に,より多くの選択肢と柔軟性を提供できます.


StarBright Blue 675 (SBB675)蛍光色素


SBB675 は,488 nmレーザーで励起される非常に明るい蛍光色素で,独自の狭い励起および蛍光プロファイルを有し,従来のフローサイトメトリーおよびフルスペクトルフローサイトメトリーに適しています(Fig. 6).

Fig. 6. SBB675.A, 従来のスペクトル.


Fig. 6. SBB675.A, 従来のスペクトル.Blueレーザー(点線)による励起と蛍光ヒストグラムB, 正規化色素シグネチャー. 全波長での全蛍光スペクトル.データは,SpectroFloソフトウェアを使用して,5-L Cytek Auroraフローサイトメトリーシステムで収集した.

Fig. 7. 明るさの比較.

Fig. 7. 明るさの比較.ヒト末梢血をCD4 SBB675 (MCA1267SBB675),CD4 PerCP-Cy5.5,CD4 BB700,およびCD4 PE-Cy5で染色した.SBB675はPerCP-Cy5.5の10倍,BB700の5倍の明るさである.

488nmレーザーで励起した場合,PerCP-Cy5.5(およびPerCP),BB700,PE-Cy5などの他の488nmレーザー励起色素よりも明るい(Fig. 7).

SBB675は従来のタンデム色素ではないため,タンデム分解や経時的な染色の変化に関する問題はない.

SBB675は,PEタンデム色素と比較して,561 nmレーザーによる励起が抑制されている.SBB675は,488 nmレーザーを組み込んだマルチカラーパネルを構築する際に,より多くの選択肢と柔軟性を提供します.


StarBright Blue 700 (SBB700)蛍光色素


SBB700蛍光色素は,フローサイトメトリー実験において,PerCP,PerCP-Cy5.5などのPerCPベースのタンデム色素,Brilliant Blue 700(BB700)の優れた代替品です.BB700と同程度に明るく,PerCP-Cy5.5よりも明るい(Fig. 9).さらに,SBB700 はユニークなスペクトルプロファイルを持っているため,フルスペクトラムのフローサイトメトリーで PerCP-Cy5.5 や BB700 と組み合わせることができます(Fig. 10).

Fig. 8. SBB700.A, 従来のスペクトル.


Fig. 8. SBB700.A, 従来のスペクトル.Blueレーザー(点線)による励起と蛍光ヒストグラム.B, ノーマライズされた色素シグネチャー.全波長での全蛍光スペクトル.データは,SpectroFlo ソフトウェアを使用し,5L Cytek Aurora フローサイトメトリーシステムで収集した.

Fig. 9. 明るさの比較.

Fig. 9. 明るさの比較.ヒト末梢血をCD4 SBB700 (MCA1267SBB700) またはCD4 PerCP-Cy5.5とCD4 BB700で染色した.SBB700はPerCP-Cy5.5の4倍明るく,BB700の1.5倍明るい.

明るさの増加に加えて,SBB700は640nmレーザーによる励起が減少しているため,PerCP-Cy5.5やBB700と比較して,多色パネルでA647やA700と組み合わせる際に必要な補正が少なくて済む.

SBB700をStarBright Violet 710 (SBV710) 蛍光色素と組み合わせた場合,比較的高いレベルの補正が必要となることがあり,その結果,~2の値が広がる.

これは大きな問題ではありませんが,コンベンショナルフローではこの組み合わせに相互排他的マーカーを使用することをお勧めします.この組み合わせは,スペクトルフローサイトメトリーにおける類似性スコアが0.64であり(SpectroFloソフトウェアを使用して決定),したがって,使用するには優れた組み合わせである.

Fig. 10. SBB700 in full spectrum flow cytometry. 


Fig. 10. フルスペクトルフローサイトメトリーにおけるSBB700.A,SBB700とPerCP-Cy5.5の全波長における蛍光スペクトル.B,ヒト末梢血単球をCD20 PerCP-Cy5.5とCD45RO SBB700(MCA461SBB700) で染色し,B細胞とT細胞のメモリー集団を明らかにした.データはCytek AuroraフローサイトメトリーシステムでSpectroFloソフトウェアを用いて収集した


StarBright Blue 765 (SBB765)蛍光色素


SBB765 Dyeは,488 nmのレーザーで励起される色素で,独自の狭い励起・蛍光プロファイルを有し,従来のフローサイトメトリーおよびフルスペクトルフローサイトメトリーに適しています..

Fig. 11. SBB765.A, 従来のスペクトル. 


Fig. 11. SBB765.A, 従来のスペクトル. Blueレーザー(点線)による励起と蛍光ヒストグラム.B, 正規化色素シグネチャー.全波長での蛍光を示す全蛍光スペクトル.データは,SpectroFloソフトウェアを使用して,5-L Cytek Auroraフローサイトメトリーシステムで収集した.

Fig. 12. 明るさ比較.

Fig. 12. 明るさ比較.ヒト末梢血をCD4 SBB765 (MCA1267SBB765) またはCD4 PE-Cy7で染色した.SBB765は,488 nmレーザーで励起された際にPE-Cy7のほぼ2倍の輝度を示す.

一部の分光分析装置では,SBB765 は 405 nm で強く励起されるため,SBV760 や BV750 のような類似した蛍光波長を持つ 405 nm 励起色素との間にスプレッドを生じます(Fig. 11).

488 nmのレーザーで励起すると,PE-Cy7よりも明るくなります(Fig. 12).SBB765は従来のタンデム色素ではないため,タンデム分解や経時的な染色の変化に関する問題がなく,PEタンデム色素と比較して561 nmレーザーによる励起が減少しています.

SBB765は,488 nmレーザーを組み込んだマルチカラーパネルを構築する際に,より多くの選択肢と柔軟性を提供します.


StarBright Blue 810 (SBB810)蛍光色素


SBB810は,独自の狭い励起および蛍光プロファイルを持つ,488 nmレーザーで励起される明るい色素であり,従来のフローサイトメトリーおよびフルスペクトルフローサイトメトリーに適しています(Fig. 13).

Fig. 13. SBB810.A, 従来のスペクトル.


Fig. 13. SBB810.A, 従来のスペクトル.Blueレーザー(点線)による励起と蛍光ヒストグラム.B, ノーマライズされた色素シグネチャー.. 全波長での全蛍光スペクトル.データは,SpectroFlo ソフトウェアを使用し,5L Cytek Aurora フローサイトメトリーシステムで収集した.

Fig. 14. 明るさの比較.

Fig. 14. 明るさの比較. ヒト末梢血をCD4 SBB810 (MCA1267SBB810) またはCD4 PE-Cy7で染色した.SBB810は,488 nmのレーザーで励起された際にPE-Cy7よりも明るい.

一部の分光分析装置では,SBB765と同じチャンネル(B14)で最大蛍光を示すことがあるが,類似度スコアが0.85であるため,併用可能である.SBB765よりも暗いにもかかわらず,405nmレーザーによる励起が低減されているため,パネルによってはこちらの方が適している場合もある.

488nmレーザーで励起した場合は,PE-Cy7よりも明るい(Fig. 14).SBB810は従来のタンデム色素ではないため,タンデム分解や経時的な染色の変化に関する問題はなく,PEタンデム色素と比較して561 nmレーザーによる励起が減少しています.

SBB810は,488 nmレーザーを組み込んだマルチカラーパネルを構築する際に,より多くの選択肢と柔軟性を提供します.



Fig. 15. SBBおよびSBV蛍光色素を含む10色パネル.


Fig. 15. SBBおよびSBV蛍光色素を含む10色パネル.ヒト末梢血をCD45 (MCA87SBV515), CD56 (MCA2693A647), CD3 (MCA463F), CD19 (MCA1940SBB810), CD4 (MCA1267SBV440), CD8 (MCA1226SBB580), で染色し,NK細胞,BおよびTリンパ球,Tヘルパー,T細胞傷害性細胞を同定した.CD14 (MCA1568SBV610) とCD16 (MCA2537A700). を用いて,クラシカル,中間的,非クラシカル単球を同定した.CD45RA (MCA88SBV710) およびCD45RO (MCA461SBB675) を用いて,ナイーブ細胞およびメモリー細胞を同定した.データはZE5 Cell Analyzerで作成.

StarBright Blue Antibodies

    DescriptionSpecificityTargetFormatHostIsotypeClone Applications Citations Product Type Code Validation Types

    関連資料

    これらの製品がフローサイトメトリー実験の有効性を向上させる方法に関する詳細情報は、当社の StarBright Dyes ページをご確認ください。

    蛍光色素と免疫フェノタイピングに関する有用な情報は、当社のフローサイトメトリー解説 ナレッジハブでご確認いただけます。または、各引用トピックに関する詳細な情報をご希望の場合は、以下の関連リソースリンクをご自由にご覧ください。このアプリケーションの基礎を学びたい方は、当社のフローサイトメトリー基礎ガイドをご覧ください。