フローサイトメトリーのサポート試薬

免疫学,がん,獣医学など幅広い分野で フローサイトメトリー検証済みの抗体 を提供しているほか,染色やサンプル前処理を最適化するための補助試薬もご用意しています.これらの試薬の使用をサポートするため,.フローサイトメトリーの実験を成功に導く従うべき重要なステップを説明した無償のポスターを作成しており,ダウンロードも可能です..

バッファー

フローサイトメトリーやその他のアプリケーションの細胞表面および細胞内抗体染色に適した各種バッファーをご用意しています.

Leucoperm – 細胞内染色用細胞透過試薬

Leucoperm試薬は,表面抗原と同様に細胞内抗原の分析を容易にします.細胞質または核内の酵素,オンコプロテイン,サイトカイン,確立された膜分子の細胞質局在などの構造を抗体で染色することができます.Leucopermを使用すると,細胞の形態を保持したまま,懸濁状態で細胞を固定・透過化することができます.

染色バッファー  ウシ胎仔血清含有染色バッファー

当社の染色バッファー は,生細胞と固定細胞の両方を抗体で染色するために最適化されています.コンジュゲート抗体とノンコンジュゲート抗体の両方に適しており,抗体希釈培地および洗浄バッファーとして使用できます.ウシ胎仔血清の添加により,標的細胞へのバックグラウンド染色を低減し,レセプターのキャッピングを最小限に抑えるためにアジ化ナトリウムを含有しています

固定バッファー- パラホルムアルデヒド含有固定バッファー

透過処理前の細胞内染色に不可欠な固定用緩衝液は,ほとんどの細胞種に使用できるパラホルムアルデヒドベースの固定液です.

活性化試薬

当社の活性化試薬は,目的の細胞を刺激するために使用できます.細胞活性化およびサイトカイン産生に関連する細胞内シグナル伝達経路は,プロテインキナーゼC,カルシウムイオノフォアであるイオノマイシンを介して,最適濃度のPhorbol 12-myristate-13-acetate(PMA)によって刺激されます

細胞刺激試薬(Brefeldin Aを含む)

DMSO中のPMAとイオノマイシンにタンパク質輸送阻害剤Brefeldin Aを添加した最適混合液は,細胞を活性化しサイトカイン産生を増加させるのに適しています.Brefeldin Aは,小胞体からゴルジ複合体への輸送を阻害し,サイトカインを細胞内に蓄積させ,細胞内蛍光染色による検出を促進します

タンパク質輸送阻害剤

細胞内にあるサイトカインの染色を強化するために,当社は2種類のタンパク質輸送阻害剤を提供しています.通常,サイトカインやケモカインは分泌されるため,これらの阻害剤を使用することで,タンパク質を細胞内に捕捉し,ゴルジ体や小胞体にサイトカインを蓄積させることができます.これらの阻害剤の選択と培養条件は,染色する生物種とサイトカインによって最適化する必要があります.

Monensin 

この阻害剤は,ゴルジ体膜貫通膜のNa+/H+輸送を阻害することにより作用します.70%エタノール中の1000倍溶液として入手できます.

Brefeldin A

ゴルジ体から小胞体へタンパク質を再分配する阻害剤.DMSO中1000倍溶液として入手できます.

Fcブロック

Fcレセプターは単球,マクロファージ,樹状細胞,B細胞に存在します.その名が示すように,抗原特異的なFabドメインではなく,一定のFcドメインを介して抗体と結合します.これは偽陽性の原因となります.このような結合を防ぐために,抗原特異的な結合のみが観察されるようにするブロック剤が開発されています.

Mouse Seroblock - マウス細胞上のFcレセプターをブロックします.

Human Seroblock - ヒト細胞上のFcレセプターをブロックします.

Fig.1. ヒト血清ブロック(BUF070A)非存在下(a)および存在下(b)における,FITC標識マウス抗ヒトCD11a(青)(MCA1848)またはマウスIgG2a陰性コントロール:FITC赤(MCA929F)によるTHP-1細胞の染色

Fig.1. ヒト血清ブロック(BUF070A)非存在下(a)および存在下(b)における,FITC標識マウス抗ヒトCD11a(青)(MCA1848)またはマウスIgG2a陰性コントロール:FITC赤(MCA929F)によるTHP-1細胞の染色

赤血球溶解用バッファー - Erythrolyseは,室温で1年間安定な10倍希釈液です.ヒト,ラット,マウス血液中の赤血球溶解に適しています.

細胞生存率測定用色素  - ほとんどのマルチカラーフローサイトメトリーに適した,さまざまな励起および蛍光波長の使いやすい細胞生存率測定用色素をご用意しています.これらには,PI,7-AAD,DAPIなどのDNA結合色素や,後日分析できるように固定可能なタンパク質結合色素VivaFix™が含まれます

細胞増殖検出用色素 - 当社の細胞増殖アッセイには,色素,TUNELアッセイキット,BrdU抗体などがあり,実験に柔軟性を与えます.また,お客様の利便性のために,様々な励起および蛍光波長でご利用いただけます.

アイソタイプコントロール - 非特異的な抗体や蛍光色素の結合によるバックグラウンドの表面染色のレベルを測定します.マウス,ラット,ハムスター,ヤギ抗体のアイソタイプコントロールを用意しています.

マルチカラーフローサイトメトリーを行う際には,いくつかの重要なステップを考慮する必要があります.慎重なサンプル前処理,Fcブロッキング,ライブ/デッド色素の封入,ダブレット排除,適切なコントロールの使用などが重要です.詳細については,フローサイトメトリーのウェビナー「Optimize your Flow Cytometry」をご覧になるか, アプリケーションリソーのページをご覧ください.


フローサイトメトリー試薬とバッファーのラインナップ

当社のフローサイトメトリー試薬およびバッファー製品群は,いずれも一般的なフローサイトメトリープロトコールに使用できます..

以下の表で,フィルターを使って並べ替え,お客様のご要望に合った製品をお探しいただけます.ご不明な点がございましたら,お気軽にお問い合わせください. .

Flow Cytometry Reagent and Buffer Range

    DescriptionSpecificityTargetFormatHostIsotypeClone Applications Citations Product Type Code Validation Types