IP-MSバリデーション抗体

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信頼性の高い結果をもたらす，厳格に検証された抗体

国際抗体検証ワーキンググループ（Uhlen ら, 2016）の推奨に基づき，PrecisionAb 抗体の検証には複数の手法を用いています．その手法には，免疫沈降–質量分析（IP-MS）による抗体バリデーションも含まれます．

IP-MSバリデーション

IP-MS バリデーションを行うため，まず抗体が細胞ライセートから標的タンパク質を免疫沈降できることを示します（Figure 1 および Figure 2）．
IP 後には，回収したタンパク質を質量分析装置で解析し，消化されたタンパク質由来の配列を同定します．

標的特異性を確認するため，バックグラウンドを差し引いた後に，検出されたユニークペプチド数とそのタンパク質量を評価します．

Fig. 1. IP-MS antibody validation workflow


Fig. 1. IP-MS 抗体バリデーションワークフロー．細胞ライセートを目的の抗体とインキュベートする．標的タンパク質の免疫沈降（IP）の後，溶出ステップを行う．
サンプルをゲル電気泳動で分離し，プロテオミクス解析に供する．多数のユニークペプチドが検出され，アバンダンスが高いタンパク質が有意なタンパク質として同定される． 

Fig. 2. Immunoprecipitation of CD44 from HeLa whole cell lysate.

Fig. 2. HeLa 全細胞溶解液からの CD44 の免疫沈降．Input レーンは 10% Input，CD44-IP レーンは CD44 抗体 (2.5 µg, MCA2726); による免疫沈降，IgG-IP レーンはマウスモノクローナル IgG (2.5 µg, MCA929). による免疫沈降である．ウェスタンブロット解析は CD44 抗体(1/1,000, MCA2726) を用いて行い，その後 HRP 標識 Immun-Star ヤギ抗マウス IgG (1/10,000, 1705047) で検出し，ChemiDoc MP イメージングシステムで撮影した．. 矢印は CD44 を示す．.

IP-MSでバリデーションされたPrecisionAb抗体

IP‑MS バリデーション済みの抗体には，製品ページ上で IP‑MS フラグと PrecisionAb 強化検証ロゴが付与されています．
下の表でフィルター機能を使用して，ご要件に合った抗体をお探しいただけます．

ご不明な点がございましたら，お気軽にお問い合わせください．※製品は研究用であり，診断目的にはご利用いただけません．

Our IP-MS Validated Antibody Range

    DescriptionSpecificityTargetFormatHostIsotypeClone Applications Citations Product Type Code Validation Types

    信頼性の高いデータのためのバリデーション済み抗体の選択

    Choosing Validated Antibodies for Trustworthy Data Bio‑Rad が採用しているバリデーション手法についてご紹介します．
    CRISPR‑Cas9 遺伝子編集，siRNA，免疫沈降と質量分析（IP‑MS）などの手法により，各アプリケーションにおける当社抗体の特異性と信頼性を確保しています． 

    他のバリデーションタイプ

    ノックアウト(KO)バリデーション済抗体

    ノックダウン(siRNA)バリデーション済抗体

     

    参考文献

    • Uhlen M et al. (2016). A proposal for validation of antibodies. Nature Methods 13, 823-827.